Veintiún metabolitos especializados conocidos fueron aislados de las flores de  Vernonanthura nudiflora  (Less.) H. Rob., las estructuras de los compuestos fueron establecidas con base en experimentos espectroscópicos de RMN 1 D y 2 D. Otros 28 compuestos fueron identificados putativamente usando la técnica de desreplicación por UHPLC-HRMS/MS. Veintitrés de los compuestos están siendo reportados por primera vez en esta especie. La mezcla de lactonas sesquiterpénicas piptocarfinas A y B ( 17 + 18 ), y la flavona velutina ( 14 ) fueron probadas contra varios microorganismos y mostraron una actividad prometedora contra  Mycobacterium tuberculosis  con MIC de 15.6 μg/mL y 31.2 μg/mL, respectivamente. Además,  17 + 18  mostró mayor citotoxicidad contra células VERO (CI50 ₌  7,0 ± 1,73) en comparación con el compuesto  14  (CI50 ₌  85,0 ± 10,6 µg/mL). Estos hallazgos revelan la viabilidad de utilizar la estrategia de desreplicación basada en UHPLC-ESI-HRMS/MS en fracciones complejas para identificar metabolitos especializados, además de que  las flores de V. nudiflora  constituyen una fuente de compuestos con potencial antimicobacteriano.